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科研試劑盒實驗中緩沖溶液等試劑的配置
發(fā)布時間： 2013-08-21 點擊次數(shù)： 1431次ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎，ELISA試劑盒以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗，把各種ELISA配置方法匯總如下：
（1） ELISA實驗包被緩沖液
（2） ELISA實驗洗滌緩沖液（2） ELISA實驗洗滌緩沖液
（3） ELISA實驗稀釋液;
（4）ELISA實驗終止液
（5）ELISA底物緩沖液
（6）ELISA實驗TMB
（四甲基聯(lián)苯胺）使用液
（7） ELISA實驗ABTS使用液
（8）ELISC。試劑
（1） ELISA實驗包被緩沖液（PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液）:
NaHCO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
（2） ELISA實驗洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至1000ml
（3） ELISA實驗稀釋液：
牛血清白蛋白（BSA） 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。
（4） ELISA試劑盒 實驗終止液（2M H2SO4）：
蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。
（5） ELISA底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:
0.2M Na2HPO4（28.4克/L） 25.7ml
0.1M 檸檬酸（19.2克/L） 24.3ml
加蒸餾水50ml。
（6） ELISA實驗TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:
TMB（10mg/5ml無水乙醇） 0.5ml
底物緩沖液（PH5.5） 10ml
0.75%H2O2 32μl
（7） ELISA實驗ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物緩沖液（PH5.5） 1ml
3%H2O2 2μl
（8）ELISA實驗封閉液：
牛血清白蛋白（BSA） 5克
加洗滌緩沖液至100ml。
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉，不適合長期保存。
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為了保證ELISA實驗的準確性，實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要，將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔，嚴防交叉污染。
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