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ELISA試劑盒常見的定量方法策略
發(fā)布時間： 2017-08-03 點(diǎn)擊次數(shù)： 2069次ELISA試劑盒測定原理：
現(xiàn)在皮質(zhì)醇ELISA試劑盒除非是測定抗體的以外，一般使用的是雙抗體夾心法，此種方法大多數(shù)用的是增強(qiáng)的雙抗體夾心法，即使用生物素-親和素系統(tǒng)，及少數(shù)的指標(biāo)可能使用競爭法，這類方法適用于半抗原的測定。具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的多表位蛋白抗原，其雙抗體夾心法中的一個抗體必須用單抗，否則背景很高。當(dāng)然如果兩個都是單抗(這兩個單抗針對不同表位)，那么測定的線性范圍就較寬，試劑盒性能就較好；一個用單抗，一個用多抗，測定的靈敏度會較高。ELISA試劑盒測定時：
因為沒有兩個或以上的表位，一般只能作為半抗原，只能用競爭法測定。如果你發(fā)現(xiàn)有測定簡單化合物(如雌激素、NO、)用雙抗體夾心法作測定原理時，這個試劑盒你就要懷疑了。另外還要說明一步雙抗體夾心法與兩步雙抗體夾心法的區(qū)別。一步雙抗體夾心法的吸光度-劑量曲線呈鐘形，隨著待則標(biāo)本中抗原濃度的增加而升高至一定程度后，測定吸光度即隨抗原濃度的增加而開始下降直至不顯色所以當(dāng)使用一步雙抗體夾心法時，樣品濃度太高，有時會出現(xiàn)測不出來的現(xiàn)象，此時要作適當(dāng)?shù)南♂尣拍軠?zhǔn)確測定。ELISA試劑盒的組成：
用雙抗體夾心法作為測定的方法時，試劑盒的組成一般包括：已包被單抗的酶標(biāo)板：一塊，有96孔的，也有48孔的，可拆缷，鋁箔袋密封，打開后有干燥劑，實驗時暫未使用的酶標(biāo)條要連帶干燥劑密封好，放在4℃冰箱中妥善保存。